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自噬

自噬

        自噬是細胞利用溶酶體降解途徑進行自我吞食的過程,是細胞在營養不足等壓力情況下維持生存的主要代謝途徑。自噬主要分為三類,即巨自噬(Macroautophagy)、微自噬(Microautophagy)、分子伴侶介導的自噬(Chaperone-mediated autophagy)。自噬在腫瘤、神經退行性疾病、心血管疾病等多種疾病中發揮重要作用。

自噬發生的過程如下:

圖一 自噬發生過程

自噬產品介

1.自噬篩選系統:

GFP-LC3 WT/MT

GFP-LC3-RFP-LC3 MT

Luciferase LC3 WT/Luciferase LC3 MT

圖二 自噬篩選系統

1.自噬檢測系統:

單熒光LC3病毒

pLenti-CMV-EGFP-LC3-PGK-Puro

pLenti-Ubc-EGFP-3FLAG-LC3

pLenti-EF1a-GFP-LC3-PGK-Puro

雙熒光LC3病毒

AdV-mCherry-GFP-LC3:高效感染

LV-mCherry-GFP-LC3:穩定表達

AAV-mCherry-GFP-LC3:在體檢測

Western Blot檢測LC3 I/IIp62:提供LC3p62抗體檢測

圖三 自噬檢測系統

2.自噬基因過表達/干擾慢病毒:

干擾慢病毒、3個靶點/基因、干擾效率70%以上

過表達慢病毒、真核表達載體ORF克隆、對應檢測抗體

圖四 自噬基因操作



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