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蛋白質組學

磷酸化蛋白質組學

背景簡介 

 

蛋白質發生翻譯后修飾時其分子質量會發生相應的改變,通過質譜能夠精確測定蛋白質或多肽的分子質量。蛋白質磷酸化是一種非常重要且廣泛存在于原核生物和真核生物中的翻譯后修飾調控方式, 參與細胞的增殖、發育、分化、凋亡,細胞骨架調控、神經活動、肌肉收縮、新陳代謝及腫瘤發生等。由于磷酸化修飾的蛋白質在生物樣本中含量低、動態范圍廣,利用定量蛋白組學分析手段對富集得到的磷酸化肽段樣品進行定量分析前,需要對修飾進行富集從而提高修飾蛋白豐度。通過蛋白定量技術和修飾富集技術相結合,可對樣本中翻譯后修飾進行相對定量,篩選差異修飾位點和差異修飾蛋白。

   

 

 

 

技術優勢 

 

全面性:以整個細胞所有蛋白為研究對象,囊括了細胞內所有具有生命功能的蛋白

可靠性:可一次性全面檢測不同蛋白激酶及磷酸化酶對同一個蛋白磷酸化程度的影響,

因而結果更加普遍性和可靠性

高效性:磷酸化蛋白質組學反映的是細胞內真實發生的事件,考慮了各種變量,

克服了經典生物學中逐步添加變量的缺陷,更為高效

探索性:磷酸化蛋白質組學以細胞內全部蛋白質為研究對象,相對于傳統的生物學研究

以及蛋白質芯片,更易發現未知的新磷酸化位點和磷酸化蛋白質

 

 

 

 

 

 

技術路線 

 

 

 

 

 

 

 

分析內容 

 

 

 

 

 

 

 

樣本類型 

 

蛋白樣品:1mg以上

組織樣品:植物組織樣本200mg以上,

血液樣品1ml以上(血漿注意用EDTA防凝),

尿液2ml,動物組織樣品至少1g,

細胞樣品為5X107個細胞,

酵母、微生物等干重200mg


 

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